当代畜牧

2005, (01) 22-23

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新疆地区绵羊种布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因的克隆与表达载体构建

杨丽娟,陈创夫

摘要(Abstract):

目的,克隆新疆绵羊种布鲁氏菌外膜蛋白Omp31基因片段。方法,以新疆地区绵羊种布鲁氏菌(80/019)菌株的基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增基因片段,通过T4DNA连接酶将扩增基因片段连接于PBS-T克隆载体上,酶切鉴定、测序、分析。结果,通过PCR技术扩增的Omp31基因片段为723bp,该片段与国际标准菌株绵羊种核苷酸序列相比同源性达98.76﹪,与国际标准菌株犬种核苷酸序列相比同源性达99.86﹪,与国际标准菌株猪种、海洋种核苷酸序列完全相同。结论,获得的目的基因与文献报的基因序列基本一致,但有一定差异。其同源性很高,为进一步研究布鲁氏菌外膜蛋白的免疫特性及开发基因工程疫苗奠定了基础。

关键词(KeyWords): 新疆绵羊种;布鲁氏菌;Omp31;克隆;序列分析

Abstract:

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基金项目(Foundation):

作者(Author): 杨丽娟,陈创夫

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